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“HotStart DNA聚合酶”参数说明
| 类别： | 分子生物学工具酶 | 用途5： | 多重PCR |
| 用途4： | 低拷贝模板PCR | 延伸速率： | 1kb/min |
| 扩增片段长度： | 3kb | 用途1： | 常规PCR |
| 用途3： | Qpcr | 用途2： | 热启动PCR |
“HotStart DNA聚合酶”详细介绍
概述：
Hot Start Taq DNA聚合酶是由普通Taq DNA聚合酶经过化学修饰得到，在室温时处于失活状态，需要经过高温（95°C）激活，可以有效减少PCR过程中的非特异性产物，具有更高的特异性和产率(1)。在使用时，PCR反应液应在95°C预加热8~10分钟进行激活，之后按照正常的PCR反应程序进行。被激活的酶和Taq DNA聚合酶功能一致，催化5’-3’DNA合成，缺少3’-5’校正活性(2,3)。Hot Start Taq DNA聚合酶适用于热启动PCR，所有操作过程可在室温完成，使用方便。
来源：
来源于一种重组的 E. coli 菌株，该菌株含有来源于Thermus aquaticus YT-1的Taq DNA聚合酶基因。
应用：
热启动PCR，RT-PCR，长度达到3 kb的基因组DNA和cDNA的特异性扩增，低拷贝模板的扩增，实时定量 PCR，多重PCR，具有3’-dA末端产物的扩增（适用各种TA克隆系统）。
反应条件：
10× 反应缓冲液 (含15 mM MgCl2)：670 mM Tris-HCl (pH 8.3 @ 25°C)，160 mM (NH4)2SO4，15 mM MgCl2，0.1% Tween 20。
质量检测:
PCR功能测试：以人基因组DNA为模板，扩增单拷贝antitrypsin基因，产物长度357 bp，相比于Taq DNA聚合酶有效减少非特异性产物并具有更高的产物产量。
核酸内切酶活性：50 μl反应体系中，20U该酶于1 μg的HindIII消化的λ DNA于37°C温浴4小时，电泳条带无明显变化。
核酸外切酶活性：50 μl反应体系中，20U该酶于1 μg的pUC19质粒于37°C温浴4小时，电泳条带无明显变化。
质保声明：
Hot Start Taq DNA聚合酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义：
1单位指经高温激活后，在72°C反应30分钟，能够使10 nmol 的dNTP掺入酸不溶性沉淀所需要的酶量。
参考文献:
1. D‘Aquila, R.T., et al., Maximizing sensitivity and specificity of PCR by preamplification heating, Nucleic Acids Res., 19, 3749, 1991.
2. Moretti, T., et al., Enhancement of PCR amplification yield ans specificity using AmpliTaqGold DNA polymerase,Biotechniques,25,716-722,1998.
3. Weyant, R.S., et al., Effect of ionic and nonionic detergents on the Taq polymerase, Biotechniques, 9, 309-308, 1990.
Hot Start Taq DNA聚合酶是由普通Taq DNA聚合酶经过化学修饰得到，在室温时处于失活状态，需要经过高温（95°C）激活，可以有效减少PCR过程中的非特异性产物，具有更高的特异性和产率(1)。在使用时，PCR反应液应在95°C预加热8~10分钟进行激活，之后按照正常的PCR反应程序进行。被激活的酶和Taq DNA聚合酶功能一致，催化5’-3’DNA合成，缺少3’-5’校正活性(2,3)。Hot Start Taq DNA聚合酶适用于热启动PCR，所有操作过程可在室温完成，使用方便。
来源：
来源于一种重组的 E. coli 菌株，该菌株含有来源于Thermus aquaticus YT-1的Taq DNA聚合酶基因。
应用：
热启动PCR，RT-PCR，长度达到3 kb的基因组DNA和cDNA的特异性扩增，低拷贝模板的扩增，实时定量 PCR，多重PCR，具有3’-dA末端产物的扩增（适用各种TA克隆系统）。
反应条件：
10× 反应缓冲液 (含15 mM MgCl2)：670 mM Tris-HCl (pH 8.3 @ 25°C)，160 mM (NH4)2SO4，15 mM MgCl2，0.1% Tween 20。
质量检测:
PCR功能测试：以人基因组DNA为模板，扩增单拷贝antitrypsin基因，产物长度357 bp，相比于Taq DNA聚合酶有效减少非特异性产物并具有更高的产物产量。
核酸内切酶活性：50 μl反应体系中，20U该酶于1 μg的HindIII消化的λ DNA于37°C温浴4小时，电泳条带无明显变化。
核酸外切酶活性：50 μl反应体系中，20U该酶于1 μg的pUC19质粒于37°C温浴4小时，电泳条带无明显变化。
质保声明：
Hot Start Taq DNA聚合酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义：
1单位指经高温激活后，在72°C反应30分钟，能够使10 nmol 的dNTP掺入酸不溶性沉淀所需要的酶量。
参考文献:
1. D‘Aquila, R.T., et al., Maximizing sensitivity and specificity of PCR by preamplification heating, Nucleic Acids Res., 19, 3749, 1991.
2. Moretti, T., et al., Enhancement of PCR amplification yield ans specificity using AmpliTaqGold DNA polymerase,Biotechniques,25,716-722,1998.
3. Weyant, R.S., et al., Effect of ionic and nonionic detergents on the Taq polymerase, Biotechniques, 9, 309-308, 1990.